Natančna Analiza Terpena

Kako natančno določiti količino terpenov v izdelkih iz konoplje

Natančna identifikacija in kvantificiranje terpenov v konoplji se je izkazalo za izjemno zahtevno analizo. To dosežemo z: (1) pravilno identifikacijo terpena, ki nas
zanima, in (2) natančnim določanjem količine. Oba parametra se medsebojno vključujeta, oba pa sta potrebna za ustvarjanje pravilnega “prstnega odtisa” terpena. Evo, kako nadzorujemo vsakega od teh parametrov.

Identifikacija

Za natančno kvantifikacijo terpenov konoplje je najpomembnejša ustrezna instrumentacija. Najpogostejši način je uporaba plinskega kromatografa z zaznavanjem plamenske ionizacije (GC / FID).

Analiza enostavnih matric; npr. Farmacevtski izdelki dobro delujejo z uporabo GC / FID zaradi nizkih motenj v ozadju, vendar se to spremeni, ko se nanese na konopljo.

V rastlini konoplje je na stotine fitokemikalij in ta naravna matrica predstavlja kromatografski izziv pri uporabi GC / FID.

Ionizacija s plamenom zazna skoraj vse v vzorcu – ne gre zamenjati z identifikacijo vsega v vzorcu.

Za rešitev te težave je GC s tandemsko masno spektrometrijo (GC / MS) odlično orodje za to analizo. GC / MS nam omogoča, da iz naše analize filtriramo neželen “šum”, s čimer natančno prepoznamo terpene, ki nas zanimajo, in ustvarimo natančen prstni odtis. Testiranje vsebnosti terpena z GC / MS nam omogoča, da dobimo tri stopnje potrditve: (1) kromatografski retencijski čas, (2) molekulska matična masa in (3) hčerinska / fragmentarna ionska masa. To odpravlja možnost lažne identifikacije vsakega analiziranega terpena.

Mass Spec (GC / MS) v primerjavi s plamensko ionizacijo (GC / FID)

Ko izberemo pravilno instrumentacijo, filtriramo neželene kromatografske motnje z masno izbiro in potrdimo identifikacijo terpenov, se začne pravi izziv – kvantificiranje vsakega terpena. Kaj to pomeni in kako je to doseženo?

Kvantitacija

Ko izberemo pravilno instrumentacijo, filtriramo neželene kromatografske motnje z masno izbiro in potrdimo identifikacijo terpenov, se začne pravi izziv – kvantificiranje vsakega terpena. Kaj to pomeni in kako je to doseženo?

Osnove kvantitacije 

Za pravilno kvantifikacijo neznane spojine se najprej ustvari linearna krivulja z uporabo znanih standardnih koncentracij za to posamezno spojino. Ko je ta linearna krivulja pripravljena, spojino v neznanem merimo s standardno krivuljo linearnosti, da določimo koncentracijo neznane spojine.

Količenje terpenov

Vsaka terpenska spojina ima edinstven signalni odziv z uporabo GC / MS. Zato se za pravilno kvantifikacijo terpenov v vzorcu generirajo 6-točkovne linearne krivulje za vsak terpen in dodajo v primerljivo matriko. Pomnožite to z vsakim od 22 terpenov, če si ogledujete 132 podatkovne točke standardov – vsak dan analize!

Izterjava terpenov

Poleg samega obsega analize zgoraj opisana 6-točkovna krivulja linearnosti deluje dobro, če je pripravljena kot standardi, izraženi tudi kot “čisti” standardi. Z drugimi besedami, ko se terpenski standardi pripravijo pri različnih koncentracijah v topilu, kot je metanol, lahko enostavno dobimo napovedni linearni graf. Ko pa te iste terpene dodamo v zapleteno matriko, kot je konoplja, pride do drastičnih sprememb.

Pri analizi čistih standardov v primerjavi z matricami z izjemno visokim hrupom v ozadju, kot je konoplja, opazimo pomembne razlike tako v GC kot v MS. Kromatografske motnje niso samo nepremostljive, če uporabljamo FID, ampak tudi kemijske lastnosti konoplje sprožijo popolno prenovo parametrov metode pri prehodu iz čiste standardne analize v analizo konoplje.

Povzetek

Doseganje pravilnega analitičnega rezultata ni nepomembna naloga. Kritični dejavniki vključujejo izbiro opreme, parametre metode instrumenta in optimizacijo ekstrakcije metode. Smernice iz okvira cGMP farmacevtske industrije, ki ga ureja FDA, zagotavljajo jasno pot do znanstveno utemeljenih odločitev o validaciji metod, ki bodo podprte s pravnim nadzorom.

V ta namen smo v industriji izvedli najobsežnejšo in najmočnejšo potrditev metode Terpene, kar je povzročilo prvo resnično kvantitativno analizo Terpena. Spremenili smo igro na analizi Terpene. Prvič imate vir, s katerim lahko dosežete pravilno vrednost Terpena, in imate znanstveno legitimnost, da to podprete.

Če želite izvedeti več o naši storitvi testiranja profila Terpenov, kliknite tukaj.